埃博拉病毒多重感染表面的快速有效消毒产品Bioxy

引言

新发传染病(EIDS)对各地人们的健康和生命造成持续性威胁。埃博拉病毒(EBV)是当前已构成威胁的新发传染病,2014 年在西非爆发,造成10000 多人死亡,数千案例已确诊。EBV 是一种包膜病毒,具有负链RNA 基因组,属于丝状病毒科。丝状病毒粒子是独特的丝状颗粒,宽约80nm,长达14000nm。由于具有高致死率,EBV 属于特殊病原,应在BSL-4实验室条件下处理。感染EBV 导致发热、呕吐、痢疾和出血,并可以通过体液(例如汗液、血液、分泌物、唾液、眼泪、母乳、粪便、鼻涕和精液)传播。尽管目前已了解到EBV 病毒粒子可在各种成分的液体介质中存活很长时间(数周),在此之前关于固体表面EBV 存活期限的研究有限,包括军用相关的多孔表面和材料。

目前仍无特别针对EBV 的U.S. EPA 病毒净化剂。根据CDC 和U.S. EPA 指引,批准用于非包膜病毒的消毒剂(认为对净化剂具有更强的抗性)可用于疑似EBV 感染表面和物体消毒。EBC属于风险级别4 病原体,使用EBV 进行研究具有危险性,仅能在有限的配备有相应的隔离设备的实验室进行。由于病毒具有独特的形态结构,不存在其它极度相关的低风险等级病毒,没有合适的替代病毒用以研究EBV。

牛痘病毒(VACV),天花病毒的近亲,属于一种包膜双链DNA 病毒。VACV 具有很多优点,可用做净化研究中的替代病毒。VACV 在BSL-2 条件下具有较高的安全性,可生长到高滴度,易通过噬斑试验定量化。另外,VACV(和其他痘病毒)是记录在案的最具持久性的病毒之王,在常温下保存数年后(至少13 年)仍然可以恢复。本研究旨在:1)检验军用表面EBV/VACV的持久性;2)评估净化剂对这些表面EBV 的效用;和3)决定VACV 是否可做EBV 去除研究中的替代病毒。

材料和方案

病毒

  • 牛痘病毒(VACV;李斯特菌株)
  • 埃博拉病毒(EBV;扎伊尔菌株)
  • 10%血清测试原油预备
  • 初始挑战等级7-(VACV)和5-6-(EBV)

测试表面/商业货架产品供应(COTS)

  • 钢、TIS(运输隔离系统),防滑和尼龙织带
  • 0.5%漂白、1%过氧化氢、蒸馏白醋、1%Bioxy-S,CALLA 1452(Zip-Chem)

测试方法

  • 标准化OECD 测试方法;30 分钟消毒剂接触时间
  • 消毒处理后病毒空斑数量与各表面类型未处理控制对比
  • 功率表达为记录减小(记录斑块(控制)-记录斑块(处理))
VACV 研究用组织培养罩、培养瓶和典型噬斑试验

测试结果

总结

  • 室温下无孔硬表面(例如钢)VACV 存活超过一个月,而EBV 为24 小时后未检测至感染病毒粒子
  • 所有四种类型表面恢复VACV 超过6 条记录,而EBV 为5 条
  • 除CALLA 以外,其他消毒技术可有效地降低30 分钟接触时间内感染的VACV
  • 醋和1%Bioxy-S 均可有效地对钢和TIS 上的EBV 进行消毒
  • 有趣的是,CALLA 在30 分钟接触时间内对EBV 非常有效
  • 醋和1%Bioxy-S 均可有效地降低5 分钟接触时间内感染VACV 病毒粒子的数量
  • 5 分钟接触时间内对EVB 的测试仍在进行中

结果和讨论

所选择的测试方法,即OECD,被证明是开展病毒杀毒效果研究的定量测试方法。

VACV,一种大型双链DNA 包膜病毒,属于水痘病毒,在常温环境下具有高持久性(20-25摄氏度和25-40%RH)。

EBV,一种细长的丝状病毒,在同样的干燥状态下干燥24 小时后未被检测到。

醋和1%Bioxy-S 均可有效地灭活VACV 和EBV,使受试表面快速消毒。

有趣的是,CALLA(EPA)对于灭活VACV 来说没有作用,但对于灭活EBV 来说非常有效。

不过,两种病毒之间无基因关联,VACV 被认为可用做功效研究中的替代病毒。

结论和研究方向

将来的研究应侧重于:

  • 体液特别是血液存在的状态下进行功效评估
  • 评估EBV 包膜和非包膜替代病毒
  • 将功效研究扩大至其他表面,特别是与飞行器和其他交通方式相关的多孔纤维材料
  • 产生其他与消毒剂例如醋和1%Bioxy-S(非腐蚀性和用户友好型)快速反应相关的数据集